放射指纹

何为放射指纹?

放射指纹是一种用于在多荧光成像中采集、分析和分离发射信号的创新方法。它由三个步骤组成, 它甚至可以区分宽重叠光谱的荧光染料。如荧光蛋白:CFP, GFP和 YFP。因此,此技术能大大增加多荧光实验中荧光染料的数量和选择性。现在,您只需点击一下按钮便可分离出之前多荧光实验中无法识别的染料。

 

步骤 1:使用光谱扫描获得整个荧光发射光谱

首先,利用光谱扫描记录样本的光谱特征。
您可以在短时间内完成同时采集这类光谱解析的图像,不仅保存了精细的样品信息,而且还能捕获快速动态过程。

步骤 2:使用 ROI 平均值确定参考光谱

其次,打开图像拆分视图,借助绘制工具或使用自动组件提取功能确定参考光谱。然后将确定好的光谱保存至 LSM 710 光谱数据库中,以便于为后续实验使用。

步骤 3:执行线性拆分

最后,线性拆分功能会通过智能算法及使用样品中每个荧光标记物的完整发射光谱逐像素地分离混合信号。
其结果是,能够完整地分离出重叠严重的发射光谱,如 GFP 和 FITC 的发射光谱;可靠的消除宽带自发荧光。这项新实验方法也能对具有自发荧光的样品进行荧光标记。